مقایسه ی دو روش مولکولی PCR و LAMP در تشخیص سالمونلا

نویسندگان: علی کرمی, علی حق نظری, زینب احمدی, سید ه مهری جوادی

چكيده زمينه و هدف: روشهاي مختلفي جهت تشخيص سالمونلا وجود دارد. اما روشهايي كه بر پايهي ژنوم و DNA هستند، تكنيكهاي بهتري جهت تشخيص ميباشند. PCR روشي سريع و حساس است و به علت كارايي بالا به طور گستردهاي در تشخيص سريع پاتوژنها به كار گرفته ميشود. اما داراي محدوديتهايي نيز ميباشد (استفاده از دستگاههاي مربوطه زمان و هزينه زيادي را ميطلبد)، به همين دليل جهت رفع اين مشكلات روشي به كار گرفته شد كه معايب روشهاي مبتني بر PCR را به حداقل برساند.روش بررسي: در اين بررسي از روش تكثير هم دماي وابسته به حلقه (LAMP) استفاده شد و با PCR مورد مقايسه قرار گرفت. براي مقايسهي PCR و LAMP از 7 سويهي مختلف سالمونلا استفاده شد. براي انجام PCR از دستگاه ترموسايكلر استفاده شد اما در روش LAMP بدون نياز به دستگاه گران قيمت ترموسايكلر و تنها با استفاده از يك بلوك دمايي ساده و ارزان، ساخت داخل كشور تشخيص انجام شد. يافتهها: نتايج نشان داد كه هر دو روش LAMP و PCR به طور اختصاصي قادر به شناسائي سالمونلا ميباشند. روش LAMP بر خلاف PCR كه بر روي ژل الكتروفورز الگوي تك باند ايجاد مينمايد يك الگوي نردباني ايجاد مينمايد و در كنترل منفي هيچ باندي مشاهد نميشود. همچنين روش LAMP 100 برابر حساستر از PCR معمولي است. بر اساس نتايج اين تحقيق در روش LAMP در عرض كمتر از 90 دقيقه تشخيص انجام شد ولي در PCR معمولي تشخيص بيش از 3 ساعت به طول انجاميد. مزيت ديگر اين روش عدم وابستگي به چرخههاي دمايي و دستگاه ترموسايكلر بود. نتيجهگيري: روش LAMPدر مقايسه با PCR تقريباً 3 برابر سريعتر، 100 برابر دقيقتر، 10 برابر ارزانتر است كه ميتواند كاربرد گستردهاي در آزمايشگاههاي تشخيص پزشكي، پزشكي قانوني، كشاورزي، تحقيقاتي و آزمايشگاههاي كوچك و سيار داشته باشد و جهت مطالعات همه گيرشناسي، تشخيص و شناسايي مورد استفاده قرار گيرد.

دانلود فایل مقاله (1724 دانلود)

نظرات

ارسال نظر

در نظر داشته باشید . . .

* دیدگاه های ارسال شده توسط شما، پس از تایید توسط این پایگاه در وب سایت منتشر خواهد شد.
* پیام هایی که حاوی تهمت یا افترا باشد منتشر نخواهد شد.
* پیام هایی که به غیر از زبان فارسی یا غیر مرتبط با مطلب باشد منتشر نخواهد شد.

ما را در شبکه های اجتماعی دنبال کنید