بررسی کارایی روش LAMP (Loop-mediated isothermal DNA amplification) در تشخیص سالمونلا

 چکیده
مقدمه: سالمونلاها از مهمترین باکتري هاي بیماري و عامل تیفوئید، باکتریمی، آنتروکولیت و سالمونلوز است که ازعفونت هاي مشترك انسان و حیوانات می باشد. بیماری هاي ناشی از این عامل یک معضل بزرگ بهداشتی در جهان به خصوص در کشورهاي در حال توسعه از جمله کشور ما می باشد. بنابراین تشخیص سریع، دقیق و به موقع آن برايجلوگیري از اپیدمی و عوارض مخرب این باکتري ضروري به نظر می رسد. براي تشخیص سالمونلا روش هاي مختلفیاشاره Real-time PCR ،PCR و روش هاي مولکولی ،Immunoassay ، وجود دارد که می توان به روش کشتنمود. تمام این روش ها به زمان طولانی، تعداد زیاد باکتري درنمونه اولیه، تجهیزات گران قیمت آزمایشگاهی و به افرادبا روش LAMP متخصص در این زمینه نیاز دارند. هدف از این مطالعه بررسی کارایی روش نوین تشخیص مولکولیدر تشخیصعامل عفونی سالمونلا تیفی می باشد. PCRجهت تشخیص 7 سویه سالمونلاي مختلف مورد LAMP با روش PCR مواد و روشها: در این تحقیق روشبر PCR بررسی و مقایسه قرار گرفتند. ژنوم باکتري ها طبق روش استاندارد استخراج و با پرایمرهاي اختصاصی در دستگاهدر یک LAMP اساس برنامه چرخه حرارتی تشخیصداده شدند. و در مقایسه با آن مجموعه پرایمرهاي اختصاصی به روشدماي واحد در بلوك حرارتی ساخته شده در داخل کشور تکثیر و محصولات ایجاد شده در ژل الکتروفورز از طریق بررسیایجاد کدورت به روش چشمی مورد تشخیصقر ار گرفتند.سریعتر، LAMP یافته هاي پژوهش: بررسی نتایج دو روش در تشخیصمولکولی سالمونلاها نشان داد که روشو برنامه چرخه حرارتی چند دمایی آن با استفاده از یک PCR ارزان تر و اختصاصی تر است و به جاي دستگاه گران قیمتبلوك حرارتی بسیار ساده و ارزان ساخت داخل کشور و در یک دماي واحد 62 درجه سانتی گراد و همچنین با مشاهدهدر زمان PCR کدورت حاصل از فرایند تکثیر ژن ها در روش جدید در مقایسه با روش الکتروفورز در بررسی محصولاتکوتاه تري به تشخیصاختصاصی این سالمونلا ها پرداخت.
بحث و نتیجه گیري: این روش می تواند جهت تشخیصمولکولی سریع، دقیق و ارزان با کاربرد گسترده در آزمایشگاه هاي تشخیصی و بخصوص تشخیصعوامل عفونی در آزمایشگاه هاي مناطق محروم و همچنین آزمایشگاه ها بسیار مورد استفاده قرار گیرد.

دانلود فایل مقاله (1666 دانلود)

نظرات

ارسال نظر

در نظر داشته باشید . . .

* دیدگاه های ارسال شده توسط شما، پس از تایید توسط این پایگاه در وب سایت منتشر خواهد شد.
* پیام هایی که حاوی تهمت یا افترا باشد منتشر نخواهد شد.
* پیام هایی که به غیر از زبان فارسی یا غیر مرتبط با مطلب باشد منتشر نخواهد شد.

ما را در شبکه های اجتماعی دنبال کنید