تشخیص همزمان عوامل شایع مننژیت باکتریایی: نایسریا مننژیتیدیس، هموفیلوس انفلونزا و استرپتوکوکوس پنومونیه با مولتی پلکس PCR

نویسندگان: علی مهرابی توانا, محمدجواد حسینی, علی کرمی, زهرا سفیری, محمد اوردی

اهداف : درمان فوري مننژيت باكتريايی به  عنوان اورژانس پزشكي مستلزم تشخيص سريع و دقيق است. اين امر مي تواند از مرگ و مير يا عوارض بعدي پيشگيري نمايد. از اين رو، هدف اين تحقيق، راه اندازي روش تشخيص مولكولي مولتیپلكس PCR برای شناسايي مننژيت باكتريايی و تشخيص عوامل شايع آن بود.

  مواد و روش ها : در اين تحقيق، از پرايمر يونيورسال و نيز پرايمرهاي اختصاصي استفاده شد. ژنوم 20 سويه باكتريايي استخراج و با شرايط استانداردشده، طي دو مرحله تحت PCR قرار گرفت. محصول PCR با ژل آگاروز 1% الكتروفورز و با سويه های استاندارد مقايسه شد. نتايج با استفاده از آنزيم Hea III تأييد گرديد.

  يافته ها: استخراج ژنوم حداقل 10 باكتري در يك ميليليتر محيط كشت برای شناسايی ضروری بود. استفاده از پرايمر يونيورسال ساختهشده از ژن 16SrRNA امكان تكثير يك قطعه 1000 جفتبازي را فراهم كرد. اين قطعه در تمام سويههای موردمطالعه مشاهده شد. استفاده از پرايمر اختصاصي براي نايسريا مننژيتيديس يك قطعه 700 جفتبازي، برای هموفيلوس انفلونزا يك قطعه 500 جفتبازي و استرپتوكوكوس پنومونيه يك قطعه 300 جفتبازي ايجاد نمود.
نتيجه گيري: روش مولكولي در فاصله حدود 3 ساعت وجود مننژيت باكتريايي را نشان می دهد و عوامل آن را شناسايي مي كند. استفاده از اين روش در آزمايشگاه هاي تشخيص طبي موجب ارتقای سطح كيفي می شود و سرعت تشخيص را نيز افزايش می دهد.

 


نظرات

ارسال نظر

در نظر داشته باشید . . .

* دیدگاه های ارسال شده توسط شما، پس از تایید توسط این پایگاه در وب سایت منتشر خواهد شد.
* پیام هایی که حاوی تهمت یا افترا باشد منتشر نخواهد شد.
* پیام هایی که به غیر از زبان فارسی یا غیر مرتبط با مطلب باشد منتشر نخواهد شد.

ما را در شبکه های اجتماعی دنبال کنید